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粪便样品DNA保存液图片
产品货号:
KD1087
中文名称:
粪便样品DNA保存液
英文名称:
Feces DNA preservation solution
产品规格:
100mL|500mL
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价

保存:RT

粪便样品DNA保存液可以在室温条件下保存DNA样品。它能迅速渗入细胞内,通过抑制DNase的活性而达到保护DNA的完整性的目的。
适用于不能及时进行DNA提取的粪便样品的采集。
保存液使用方法:
一:批量自采:
1:采便管准备
1)患者采样盒中包括:采便管2管(每管装有7.5mL保护液以及6-8颗玻璃珠),冰袋3个。
2)患者回家后,需将冰袋放入冰箱冷冻层,并在送样当天进行采便。
2:采便方式:
1)准备一张纸在排便时将大便与便池水隔绝;
2)采便时取中部未沾染便池水和尿液的大便;
3)用采便管中的小勺挖取粪便,放入采便管中,盖紧管盖,放入采样盒中;
注意:2个采便管都需要挖取粪便,每管挖取3-4勺粪便;
4)从冰箱冷冻层中取出冻好的冰袋,放入蓝色采样盒中,以保持样品低温环境,并尽快送回医院。
二:少量自采
1:在粪便样品中加入3~5倍体积的粪便样品DNA保存液。
保存时间说明:
1:实测粪便样品DNA保存液,于4℃可稳定保存DNA 15~30天;于室温(≤30℃)可稳定保存DNA 7~15天。
2:如需长期保存,可在粪便DNA提取步骤3中弃上清后直接-20℃或-80℃长期冻存。
粪便DNA提取:
1:取200μL样品匀浆至拧盖的2mL离心管。
样品匀浆制备:1)将采便管用用漩涡震荡器,混匀至无块状;
2)用1mL注射器接1mL枪头搅拌;
3)枪头(1mL)减去1cm左右,吸之前摇匀,尽量吸取内容物,否则提取的DNA量过少;
2:加入1mL PBS,用旋涡振荡器混合均匀,离心(15000rpm,5min,4℃)。
3:弃1mL上清,重复2一次。
4:弃950μL上清后,加入300μL Tris-SDS,500μL Tris-饱和酚,移入已加入0.33~0.35g玻璃珠(φ0.1mm)的2mL圆底离心管中。
5:震荡呈乳白色,在均质(Beat-Bitter)中均质45s,离心(15000rpm,5min,4℃)。
6:将上层悬浊液400μL(2×200)转移到一个新的离心管中(圆头),加入200μL Tris-酚,200μL氯仿/异丙醇(24:1)注:中间白色为变性蛋白相不能碰。
7:手摇(10~20次)(上下颠倒即可,轻柔),混匀呈白色,离心(15000rpm,5min,4℃)。
8:将250μL(2×125)上层悬浊液转移到新的1.5mL离心管中,加入25μL 3M的乙酸钠(pH=5.2),加入300μL异丙醇,手摇混匀后离心(15000rpm,5min,4℃)。-20℃静置20min.
9:弃上清(直接倒掉即可),加入500μL 70%乙醇,手摇混匀,离心(15000rpm,5min,4℃)。
10:弃上清(直接倒掉即可),离心(12000rpm,1min,常温),用枪头(斜)吸去多余液体,开盖,室温干燥15min。
11:加入100μL TE,5μL RNA酶,轻弹混匀,小离心机轻微离心(到6000rpm立即停止),37℃恒温箱静置10min.
12:测定浓度及电泳。
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